Caracterización de bacterias promotoras de crecimiento vegetal en las raíces de la orquídea Guarianthe skinneri (Bateman) Dressler y W.E. Higgins / Trinidad Aguilar Díaz

Tesis Maestría en Ciencias en Recursos Naturales y Desarrollo Rural El Colegio de la Frontera Sur 2017

Incluye bibliografía

Dedicatoria y Agradecimientos.. Tabla de Contenido.. Resumen.. I. Introducción.. Ii. Revisión de Literatura.. 2.1 La familia Orchidaceae.. 2.2 Las orquídeas del Soconusco.. 2.3 Guarianthe skinneri (Bateman Dressler & W.E. Higgins.. 2.4 Microorganismos en los exudados radiculares.. a Interacciones de hongos micorrízicos-bacterias benéficas.. b Nutrientes para el desarrollo de las plantas.. c Solubilización de fosfato.. d Hormonas de crecimiento.. e Fijación del nitrógeno.. f Bacterias promotoras de crecimiento vegetal.. III. Justificación.. IV. Preguntas de Investigación.. V. Hipótesis.. 6.1 Objetivo general.. 6.2 Objetivos específicos.. VI. Objetivos.. VII. Metodología.. 7.1 Diseño general del trabajo de investigación.. 7.2 Colecta de raíces de Guarianthe skinneri.. 7.3 Aislamiento y cultivo de los aislados bacterianos.. 7.4 Análisis macroscópico y microscópico de las colonias.. 7.5 Conservación de las colonias bacterianas.. 7.6 Compatibilidad de las bacterias con el Hongo micorrízico RG26.. 7.7 Determinación de la solubilización de fosfato inorgánico.. 7.8 Evaluación de la producción del ácido indolacético (AIA.. 7.8.1 Curva patrón del ácido indol acético (AIA.. 7.8.2 Determinación de ácido indol acético (AIA de las bacterias.. 7.9 Evaluación de fijación biológica de nitrógeno (FBN.. 7.9.1 Curva patrón del etileno.. 7.9.2 Determinación de la capacidad de fijación de nitrógeno de las bacterias.. 7.10 Identificación molecular de las cepas seleccionadas.. 7.10.1 Extracción de ADN de las bacterias.. 7.10.2 Amplificación de la región 16s rADN.. 7.10.3 Purificación de los productos de PCR.. 7.11 Análisis estadístico

VIII. Resultados.. 8.1 Caracterización macroscópica y microscópica de bacterias cultivables, aisladas en las raíces de G. skinneri.. 8.2 Compatibilidad de las cepas bacterianas con el hongo micorrízico Thanatephorus sp., cepa RG26.. 8.3 Determinación de la solubilización de fosfato inorgánico.. 8.4 Evaluación de la producción del ácido indolacético (AIA.. 8.5 Evaluación de fijación biológica de nitrógeno.. 8.6 Identificación molecular de las bacterias.. 8.7 Selección de las cepas bacterianas.. IX. Discusión General.. 9.1 Aislados bacterianos en las raíces de la orquídea G. skinneri.. 9.2 Compatibilidad de las cepas bacterianas con el hongo micorrízico Thanatephorus sp., cepa RG26.. 9.3 Solubilización de fosfato inorgánico.. 9.4 Producción del ácido indolacético (AIA.. 9.5 Fijación biológica de nitrógeno (FBN.. 9.6 Caracterización de las cepas para considerarse como "Bacterias promotoras de crecimiento vegetal (BPCV".. X. Conclusiones.. XI. Recomendaciones.. XII. Literatura Citada.. XIII. Anexo.. 13.1 Resultados de mediciones de las cepas bacterianas en relación a la solubilización de fosfato.. 13.2 Datos de la curva estándar de AIA para obtener la ecuación de la recta.. 13.3 Producción de AIA de los aislados del rizoplano y endófitas+rizoplano, de acuerdo a la absorbancia a 530 nm y analizando con la ecuación de la recta.. 13.4 Resultados para la curva de patrón de etileno y de las cepas bacterianas seleccionadas.. 13.4.1 Análisis de datos de las 9 cepas bacterianas fijadoras de nitrógeno.. 13.5 Resultados análisis de secuencias de las 10 cepas bacterianas.. 13.6 Artículo sometido a la revista

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El objetivo de este estudio fue aislar bacterias presentes en la raíces de la orquídea Guarianthe skinneri (Bateman) Dressler & W.E. Higgins, con el fin de encontrar algunas bacterias promotoras de crecimiento vegetal. Se recolectaron raíces jóvenes con característica fitosanitaria sana, a partir de 10 plantas procedentes del Jardín Botánico Regional del Soconusco, Tuzantán, Chiapas. Se aislaron bacterias del rizoplano y endófitas+rizoplano para caracterizarlas macroscópicamente y microscópicamente, realizando pruebas en condiciones in vitro como: interacción con el hongo micorrízico Thanatephorus sp., (cepa RG26), solubilización de fosfato, producción de ácido indolacético (AIA) y fijación de nitrógeno. El total de colonias bacterianas aisladas fue de 71. En cuanto a los resultados de interacción con el hongo micorrízico RG26 se observó que 6 cepas del rizoplano y 5 cepas endófitas+rizoplano tuvieron una interacción sumamente positivo; 7 cepas del rizoplano y 11 cepas endófitas+rizoplano, positivo; 11 cepas del rizoplano y 14 cepas endófitas+rizoplano antagonismo al 50-50 y 7 cepas del rizoplano y 8 cepas endófitas+rizoplano antagonismo. En relación a la solubilización de fosfato, se obtuvo que 26 cepas del rizoplano y 32 cepas endófitas+rizoplano solubilizaron el fosfato. Respecto a la producción de AIA, la cepa 1-7c del rizoplano alcanzó la mayor producción de AIA, con 69.18 μg/ml y la cepa endófitas+rizoplano 2-10bp presentó 15.95 μg/ml. En los análisis de fijación de nitrógeno se obtuvieron diferencias estadísticas significativas (p-value: 0.05) siendo la cepa del rizoplano 1-10d que presentó mayor concentración de etileno con 10.25 nmol. Mediante la secuenciación del marcador 16s rADN se identificaron 6 cepas: Sphingomonas sp., Sinorhizobium sp., Bacillus sp., Nocardia cerradoensis, Bacillus megaterium y Burkholderia phytofirmans. La bacteria Bacillus sp., es la mejor cepa para la inoculación de semillas y plántulas de la orquídea G. skinneri, ofreciendo nuevos caminos a reconocer para la consideración de este germoplasma en la región del Soconusco. spa

Manejo y Conservación de Recursos Naturales