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1.
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Variation in the cuticular hydrocarbons of the Mexican fruit fly Anastrepha ludens males between strains and age classes
Bosa Ochoa, Carlos Felipe ; Cruz López, Leopoldo Caridad (coaut.) ; Guillén Navarro, Griselda Karina (coaut.) ; Zepeda Cisneros, Cristina Silvia (coaut.) ; Liedo Fernández, Pablo (coaut.) ;
Contenido en: Archives of Insect Biochemistry and Physiology Vol. 99, no. 3, e21513 (November 2018), p. 1-13 ISSN: 1520-6327
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Resumen en inglés

In this study cuticular hydrocarbons (CHCs) were characterized from wings of individual unmated males of different Anastrepha ludens (Loew) mass‐reared strains of different ages (3 and 19‐day‐old): (a) a standard mass‐reared colony (control), (b) a genetic sexing strain, (c) a selected strain, (d) a hybrid strain, and (e) wild males. We found that the hydrocarbon profiles in all males included two n‐alkanes, five monomethyl alkanes, and two alkenes. CHCs ranged from C26 to C31. The most prominent peaks were 2‐ methyloctacosane (2‐Me‐C28), n‐nonacosene (C29:1), 2‐ methyltriacontane (2‐Me‐C30), and n‐hentriacontene (C31:1). Significant variations in the CHC amounts of the mass‐reared strains were observed from Day 9 and thereafter. Comparison of CHCs using multivariate and canonical analyses across ages and among mass‐reared strains and wild males revealed qualitative and quantitative differences. The relative amounts of C29:1 and 2‐Me‐C30 were significantly higher across age groups in the mass‐reared strains than those in the wild males. In contrast, amounts of n‐nonacosane (C29) significantly increased in wild males as they aged. Through statistical analyses, we inferred that CHC amounts vary with age. Wild males differed significantly from the mass‐reared strains in the amount of C29, and the genetic sexing strain Tap‐7 had significantly higher values for 2‐methylhexacosane (2‐Me‐C26). In contrast the selected and control strain differed from the other strains in amounts of C29:1 and 2‐Me‐C30. We suggest that differential profiles in hydrocarbon composition among the strains may be mainly due to environmental pressures.


2.
- Artículo con arbitraje
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We compared the calling and mating behavior and volatile release of wild males Anastrepha ludens (Loew) with males from 4 mass-reared strains: (i) a standard mass-reared colony (control), (ii) a genetic sexing strain (Tap-7), (iii) a colony started from males selected on their survival and mating competitiveness abilities (selected), and (iv) a hybrid colony started by crossing wild males with control females. Selected and wild males were more competitive, achieving more matings under field cage conditions. Mass-reared strains showed higher percentages of pheromone calling males under field conditions except for Tap-7 males, which showed the highest percentages of pheromone calling males under laboratory cage conditions. For mature males of all strains, field-cage calling behavior increased during the last hour before sunset, with almost a 2 fold increase exhibited by wild males during the last half hour. The highest peak mating activity of the 4 mass-reared strains occurred 30 min earlier than for wild males. By means of solid phase microextraction (SPME) plus gas chromatography-mass spectrometry (GCMS), the composition of volatiles released by males was analyzed and quantified. Wild males emitted significantly less amounts of (E,E)-α-farnesene but emitted significantly more amounts of (E,E)-suspensolide as they aged than mass-reared males. Within the 4 mass-reared strains, Tap-7 released significantly more amounts of (E,E)-α-farnesene and hybrid more of (E,E)-suspensolide. Differences in chemical composition could be explained by the intrinsic characteristics of the strains and the colony management regimes. Characterization of calling behavior and age changes of volatile composition between wild and mass-reared strains could explain the differences in mating competitiveness and may be useful for optimizing the sterile insect technique in A. ludens.


3.
Tesis - Doctorado
Estudio comparativo de factores bioecológicos en diferentes biotipos de la mosca Mexicana de la fruta Anastrepha ludens (Loew) Diptera: Tephritidae / Carlos Felipe Bosa Ochoa
Bosa Ochoa, Carlos Felipe ; Cruz López, Leopoldo Caridad (director) ; Liedo Fernández, Pablo (asesor) ; Guillén Navarro, Griselda Karina (asesora) ; Zepeda Cisneros, Cristina Silvia (asesora) ;
Tapachula, Chiapas, México : El Colegio de la Frontera Sur , 2014
Clasificación: TE/595.774 / B6
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Resumen en español

Para el control de Anastrepha ludens, plaga importante en cultivos frutales, se utiliza la Técnica del Insecto Estéril (TIE). Actualmente, se cuenta con una cepa sexada genéticamente denominada “Tapachula-7” (Tap-7) desarrollada en el Programa MOSCAFRUT. Además, con el objetivo de mejorar el desempeño de los machos estériles, se investigan diferentes métodos de colonización, como la selección y la hibridación. En esta investigación se realizó un análisis comparativo de los biotipos de selección, híbrido, Tap-7, laboratorio (control), y silvestres; con el fin de establecer similitudes o diferencias en su comportamiento y fisiología. Se evaluó su comportamiento de llamado y la competitividad sexual, la liberación de volátiles, la composición de hidrocarburos cuticulares (HC), la respuesta electrofisiológica de antenas (EAG), y la cantidad de transcritos para una proteína con función olfativa. En condiciones de laboratorio, la cepa Tap-7 presentó los mayores porcentajes de llamado y el silvestre los menores porcentajes. Para la competitividad sexual en jaulas de campo, los biotipos de cría presentaron mayores porcentajes de llamado que los silvestres, los machos de selección (F1) y silvestres, seguidos del híbrido (F1) presentaron los mayores porcentajes de cópulas con hembras silvestres. De acuerdo al análisis de composición de volátiles e HC de machos, ocurrieron cambios significativos en la cantidad de compuestos por biotipo con la edad. Los machos silvestres difirieron significativamente por el (E,E)-suspensólido, y Tap-7 por (E,E)-α-farneseno. Los machos de selección y control difirieron significativamente para los HC C29:1 y 2-Me- C30, Tap-7 para 2-Me-C26, y silvestres para C29.

En las pruebas de EAG los biotipos de cría presentaron mayores respuestas significativas que los silvestres, y para la expresión de proteína hubo diferencias significativas en hembras pero no en machos. Estas variaciones podrían explicar las diferencias observadas en competitividad, y podrían deberse a características biológicas intrínsecas de los biotipos.

Índice

Resumen
Capítulo I
1. Importancia Económica de las Moscas de la Fruta
2. Clasificación de Anastrepha Ludens
3. Comportamiento Sexual de A. Ludens
3.1 Características del Cortejo y Apareamiento en A. Ludens
4. Componentes de la Feromona en Anastrepha Ludens
5. La Técnica del Insecto Estéril (TIE)
6. Cepas de Sexado Genético (CSG)
7. Hidrocarburos Cuticulares en Insectos (HC)
7.1 Hidrocarburos Cuticulares en Tephritidos
8. Respuesta Olfativa en Insectos
8.1 Estudios de Olfacción en Moscas de la Fruta
9. Desempeño Biológico de Insectos de Crías Masivas
Justificación
Objetivos
Objetivo General
Objetivos Específicos
Materiales y Métodos
Capítulo II
Sexual Behaviour and Male Volatile Compounds In Wild and Mass-Reared Strains of the Mexican Fruit Fly Anastrepha Ludens (Loew) (Diptera: Tephritidae) Held Under Different Colony Management Regimes
Capítulo III
Cuticular Hydrocarbons of the Mexican Fruit Fly Anastrepha Ludens Males (Diptera: Tephritidae): Comparison Among Strains and Aging
Capítulo IV
Respuesta Olfativa de Diferentes Biotipos de Anastrepha Ludens Loew (Diptera: Tephritidae)
Capítulo V
Conclusiones Generales
Literatura Citada
Anexos


4.
- Artículo con arbitraje
Genetic structure of populations of Anastrepha ludens (Diptera: Tephritidae) in Mexico
Molina Nery, Mayra Carolina (autora) ; Ruiz Montoya, Lorena (autora) (1964-) ; Zepeda Cisneros, Cristina Silvia (autora) ; Liedo Fernández, Pablo (autor) ;
Disponible en línea
Contenido en: Florida Entomologist Vol. 97, no. 4 (December 2014), p. 1648-1661 ISSN: 0015-4040
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Resumen en español

La amplia distribución de Anastrepha ludens (Loew) (Diptera: Tephritidae) en México y el uso de diferentes plantas hospederas taxonómicamente no relacionadas sugiere que esta es una especie con alto potencial evolutivo y representa una plaga de alto riesgo. Se investigó la diversidad y estructura genética de poblaciones de Anastrepha ludens en siete estados de la República Mexicana (Chiapas, Yucatán, Morelos, Veracruz, San Luis Potosí, Tamaulipas y Durango). Las moscas se colectaron como larvas dentro de frutos de cítricos en cada estado, y se enviaron como pupas al Laboratorio de Sexado Genético de la planta “Moscafrut” en Metapa, Chiapas, en donde emergieron los adultos y se analizaron genéticamente. La diversidad genética de las poblaciones se estimó con base en la heterocigosidad observada y esperada, se obtuvo el número promedio de alelos y el polimorfismo, con base en las frecuencias alélicas y genotípicas de seis loci enzimáticos revelados en acetatos de celulosa. La heterocigosidad esperada (He) fue de 0.199 a 0.330, y el porcentaje de loci polimórficos (P) fue entre 50 y 67%. Se encontró un alto coeficiente de endogamia (Fis= 0.393, Fit = 0.456) y una diferenciación genética moderada entre poblaciones (Fis = 0.393, Fit = 0.456). La correlación entre la altitud y He fue negativa. Concluimos que las poblaciones de A. ludens son genéticamente diversas y con nivel de diferenciación moderado. La estructura genética no pudo ser atribuida a la distancia geográfica entre poblaciones. Probablemente, la diferenciación pueda ser resultado de la selección asociada al proceso de colonización. La deriva genetica y las prácticas de manejo posiblemente han contribuido a esta diferenciación en menor grado.

Resumen en inglés

The wide geographic range of Anastrepha ludens (Loew) (Diptera: Tephritidae) in Mexico and its ability to use various taxonomically unrelated host plant species suggests that this species has considerable evolutionary potential and represents a high risk pest. The genetic diversity and structure of A. ludens populations from 7 Mexican states (Chiapas, Yucatán, Morelos, Veracruz, San Luis Potosí, Tamaulipas and Durango) were investigated. Flies were collected as larvae from infested citrus fruits in each state, and sent as pupae to the Genetic Sexing Laboratory at the “Moscafrut ” facility in Metapa, Chiapas, where adults emerged and were used in isoenzymatic analysis. Genetic diversity was estimated based on expected and observed heterozygosity, mean number of alleles and polymorphism obtained from allelic and genotypic frequencies of 6 enzyme loci revealed in cellulose acetate. Expected heterozygosity (He) ranged from 0.199 to 0.330, and percentage of polymorphic loci (P) was between 50 and 67%. We found a high level of inbreeding (Fis = 0.393, Fit = 0.456) and moderate genetic differentiation among populations (Fst = 0.105). A negative correlation was found between elevation and He. We conclude that A. ludens populations are genetically diverse with moderate levels of differentiation. Genetic structure could not be attributed to the geographic distance among populations. Differentiation could be the result of natural selection associated with the colonization process. Genetic drift and pest management practices may have contributed to this differentiation to a lesser extent.


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Resumen en inglés

We compared the calling and mating behavior and volatile release of wild males Anastrepha ludens (Loew) with males from four mass-reared strains: i) a standard mass-reared colony (control), ii) a genetic sexing strain (Tap-7), iii) a colony started from males selected on their survival and mating competitiveness abilities (selected), and iv) a hybrid colony started by crossing wild males with control females. Selected and wild males were more competitive, achieving more matings under field cage conditions. Mass-reared strains showed higher percentages of pheromone calling males under field conditions except for Tap-7 males, which showed the highest percentages of pheromone calling males under laboratory cage conditions. For mature males of all strains, field-cage calling behavior increased during the last hour before sunset, with almost a two-fold increase exhibited by wild males during the last half hour. The highest peak mating activity of the four mass-reared strains occurred 30 min earlier than for wild males. By means of Solid Phase Microextraction (SPME) plus Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS), the composition of volatiles released by males was analyzed and quantified. Wild males emitted significantly less amounts of (E,E)-α-farnesene but emitted significantly more amounts of (E,E)-suspensolide as they aged than mass-reared males. Within the four mass-reared strains, Tap-7 released significantly more amounts of (E,E)-α-farnesene and hybrid more of (E,E)-suspensolide. Differences in chemical composition could be explained by the intrinsic characteristics of the strains and the colony management regimes. Characterization of calling behavior and age changes of volatile composition between wild and mass-reared strains could explain the differences in mating competitiveness and may be useful for optimizing the sterile insect technique in A. ludens.


6.
Tesis - Maestría
Obtención de mutantes con Metanosulfonato de Etilo (EMS) en Anastrepha ludens L. (Diptera: Tephritidae) / Hugo Alberto Ríos Pérez
Ríos Pérez, Hugo Alberto ; Toledo, Jorge (tutor) ; Malo Rivera, Edi Álvaro (asesor) ; Zepeda Cisneros, Cristina Silvia (asesora) ; Ramos Morales, Patricia (asesora) ;
Tapachula, Chiapas, México : El Colegio de la Frontera Sur , 2012
Clasificación: TE/632.774 / R5
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Índice | Resumen en: Español |
Resumen en español

Uno de los pilares de nuestra economía nacional es el sector agrícola y a menudo se ve afectada por diversos factores, como la presencia de plagas. En México existe un complejo de plagas de importancia económica. La mosca mexicana de la fruta Anastrepha ludens es una de las especies que conforman este complejo, por lo que se requiere la implementación de estrategias para evitar su propagación. El estudio de la genética de los organismos plagas puede ser utilizado para optimizar métodos de control como la Técnica del Insecto Estéril (TIE). En experiencias previas como el caso de Ceratitis capitata se ha logrado la construcción de cepas sexadas genéticamente (CSG) mejorando así, la eficiencia de la técnica, esto se logró al acumular gran cantidad de información genética sobre esta especie y por la gran diversidad de marcadores mutantes (fenotípicos y metabólicos) que se han encontrado, los cuales son fundamentales en el desarrollo de estas CSG. Por lo que es prioritario desarrollar metodologías que nos permita obtener organismos mutantes en A. ludens de manera eficiente. En Drosophila melanogaster, se utilizan técnicas basadas en la construcción de familias derivadas de organismos expuestos a mutágenos. La endogamia de las familias recobradas incrementa considerablemente la probabilidad de que se generen y aíslen organismos mutantes. Además, del uso de sustancias como el metanosulfonato de etilo (EMS) aumenta la probabilidad de obtención de mutantes. El objetivo de este trabajo fue inducir mutantes de A. ludens mediante la producción de familias a partir de machos tratados con EMS. Evaluando una serie de diluciones sucesivas de EMS a partir de una solución patrón de 9 mM, se inyectaron machos (adultos), que posteriormente fueron cruzados con hembras vírgenes no tratadas y se obtuvo su descendencia.

Se aislaron tres nuevos marcadores genéticos morfológicos: uno de color de cuerpo y dos de cerdas. Los cuales fueron nombrados red body (rb), Brush (Br) y bristleless (brless) respectivamente. Las pruebas para determinar el patrón de herencia sugieren que rb es originado por un gen autosómico recesivo, Br es causado por un gen autosómico dominante que es letal en homocigosis , y brless depende también un gen autosómico pero recesivo. Una vez que se estabilizaron estas líneas mutantes fueron evaluados algunos atributos biológicos y la competitividad sexual para cada una de ellas; en condiciones de laboratorio con respecto a la cepa Chis (fenotipo silvestre) mostrando diferencias con respecto a ella, red body presenta viabilidad y competitividad mayor que Chis; en el caso de Br la baja viabilidad mostrada es debido a su patrón de herencia y una competitividad igual que la cepa de fenotipo silvestre; y para brless la viabilidad y la competitividad son menores en comparación con la cepa Chis. La cepa rb puede ser de utilidad en la TIE. Sin embargo, es necesario realizar las pruebas para evaluar otros parámetros de calidad de los adultos como longevidad, dispersión y otras características de los mutantes para evaluar su uso potencial en el control de la mosca de la fruta A. ludens.

Índice

Resumen
1. Introducción
1.1 El Manejo integrado de plagas (MIP) y sus Perspectivas
1.2 El Manejo Integrado de Plagas en áreas extensas
1.3 El uso de insectos estériles. Control autocida
1.4 Bases de la Técnica del Insecto Estéril (TIE)
1.5 El Desarrollo de Cepas Sexadas Genéticamente (CSG)
1.6 Alcances de la Toxicología en la inducción de mutantes
1.6.1 Toxicología genética
1.6.2 Mutagénesis
1.6.3 Utilización del sistema de Mutaciones Letales recesivas ligadas al sexo para producir mutantes
1.7 Metanosulfonato de Etilo (EMS)
1.8 Anastrepha ludens Loew (Tephritidae)
2. Justificación
3. Objetivos
Objetivo general
Objetivos particulares
4. Materiales y Métodos
4.1 Características del mutágeno
4.2 Obtención y manejo de adultos de A. ludens de la cepa silvestre Chis
4.3 Microinyección de EMS
4.4 Obtención de la F1
4.5 Obtención de la F2
4.6 Manejo de los organismos mutantes
4.7 Determinación del patrón de herencia de los mutantes
4.8 Viabilidad y atributos biológicos de las cepas mutantes
4.9 Competitividad Sexual de machos de las cepas mutantes
4.10 Análisis de datos
5. Resultados
5.1 Curva de dosis respuesta
5.2 Progenie por macho
5.3 Descripción de los mutantes obtenidos
5.3.1 Mutación red body (rb)
5.3.2 Mutación Brush (Br)
5.3.3 Mutación bristleless (brless)
5.4 Viabilidad y transformación de las cepas mutantes y de la cepa silvestre (Chis)
5.5 Competitividad sexual de las moscas mutantes
6. Discusión
7. Conclusiones
8. Bibliografía


7.
Tesis - Maestría
Diferenciación genética y demográfica de poblaciones de Anastrepha ludens (Diptera: Tephritidae) en México / Mayra Carolina Molina Nery
Molina Nery, Mayra Carolina ; Ruiz Montoya, Lorena (tutora) (1964-) ; Zepeda Cisneros, Cristina Silvia (asesora) ; Liedo Fernández, Pablo (asesor) ;
San Cristóbal de Las Casas, Chiapas, México : El Colegio de la Frontera Sur , 2011
Clasificación: TE/632.7740972 / M6
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Resumen en español

En este trabajo se estimó la variación aloenzimática y demográfica, y el flujo genético entre poblaciones de Anastrepha ludens en siete estados de la república (Chiapas, Durango, Morelos, San Luis Potosí, Tamaulipas, Veracruz y Yucatán) para reconocer el grado de conexión o aislamiento entre poblaciones separadas geográficamente. En cada estado se colectaron frutos de Citrus spp. infestados con larvas de A. ludens, una vez que se obtuvieron las pupas se enviaron al laboratorio de Sexado Genético- Programa MOSCAFRUT en Metapa de Domínguez, Chiapas. Se realizó el análisis genético con ejemplares adultos de cada población. Se estimó la variación aloenzimática en seis loci y el grado de diferenciación genética entre poblaciones y flujo genético (Nm). Mediante un análisis de asignación de genotipos multilocus se estimó el número probable de individuos inmigrantes. La heterocigosidad esperada (He) varió de 0.199 a 0.330, el polimorfismo (P) entre 50 y 66%. La diferenciación genética entre poblaciones fue de FST=0.09. El flujo genético (Nm) entre pares de poblaciones varió entre 0.8 y 37 individuos por generación y fue negativamente asociado con la distancia geográfica lineal que separa las poblaciones. El análisis de asignación multilocus reveló un patrón de flujo asimétrico entre poblaciones.

Para el análisis demográfico se mantuvieron grupos de 50 parejas de adultos en jaulas a 24°C, durante dos generaciones. Se tomaron muestras de los huevecillos ovipositados a partir de estos se registró la supervivencia en cada uno de los diferentes estados fisiológicos (H-L, L1 a L3, L3-P, P-A). La supervivencia de la población de Morelos fue mayor y significativamente diferente al resto de las poblaciones en la generación parental. En la generación F1 las poblaciones de Chiapas y Durango alcanzaron los valores más altos de supervivencia y fueron significativamente diferentes al resto de las poblaciones. No se encontró relación entre la heterocigosidad (He) y la supervivencia. Se discute la implicación que estos resultados pueden tener sobre las acciones de manejo de la Campaña Nacional contra Moscas de la Fruta.

Índice

Resumen
1. Introducción
2. Antecedentes
2.1. Diagnosis taxonómica
2.2. Descripción morfológica
2.3. Ciclo de vida
2.4. Distribución y hospederos
2.5. Flujo Genético
2.6. Diversidad Genética
2.7. Demografía
3. Objetivos
3.1. Objetivo general
3.2. Objetivos específicos
4. Hipótesis
5. Materiales y Métodos
5.1. Sitios de colecta
5.2. Muestreo
5.3. Parámetros genéticos
5.4. Análisis de Datos
5.5. Parámetros demográficos
5.6. Análisis de Datos
6. RESULTADOS
6.1. Diversidad genética
6.2. Estructura y Flujo Genético
6.3. Supervivencia
7. Discusión
Agradecimientos
Literatura Citada


8.
Artículo
*En hemeroteca, SIBE-San Cristóbal
Análisis cariotípico y diferenciación de cromosomas sexuales en cuatro especies de Anastrepha (Diptera:Tephritidae)[Recurso electrónico]
Ibañez Palacios, Jorge ; García Velazquez, Armando (coaut.) ; Zepeda Cisneros, Cristina Silvia (coaut.) ; Corona Torres, Tarsicio (coaut.) ;
Contenido en: Revista Agrociencia Vol. 44, no. 6 (agosto-septiembre 2010), p. 691-700 ISSN: 1405-3105
Bibliotecas: San Cristóbal
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49834-10 (Disponible)
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Nota: En hemeroteca, SIBE-San Cristóbal
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Resumen en español

El género Anastrepha Schiner, endémico en América tropical y subtropical, incluye a la especie Anastrepha ludens, A. obliqua, A. striata y A. serpentina que son polífagas y que parasitan una amplia gama de plantas. Estas especies se estudiaron por su amplia distribución geográfica y por parasitar a diferentes especies de frutas, para lo cual se usaron larvas de tercer estadio desarrolladas en el laboratorio del Programa Moscafrut en Metapa de Domínguez, estado de Chiapas, México. Se disectó el ganglio cerebral en solución acuosa de citrato de sodio 1 % (p/v) donde se mantuvo 20 min, se transfirió a metanol: ácido acético 3:1 (v/v), y se maceró en ácido acético 60 %. Una gota de este tejido en suspensión se colocó en un portaobjetos sobre una plancha caliente (45- 50 °C). Se observó al microscopio (Zeiss Axioskop 40) con contraste de fases, seleccionando células con cromosomas dispersos. Se fotografiaron con una cámara AxioCam y software Axiovision 4.0 realizando mediciones con el programa Image Tool 3.0. El análisis se realizó con 20 células/sexo/ especie.

Se determinaron los cariotipos en: A. ludens , 2n=12, Xg Xg+VII telo, n. f. 12, , 2n=12, Xg Yp+VII Telo n. f. 12; A. obliqua , 2n=12, Xg Xg+VII Telo, n. f. 12, , 2n=12, Xg Yg+VII Telo n. f. 12; A. striata , 2n=12, Xg Xg+IIII Meta+IIIII Telo n. f. 16, , 2n=12, Xg Yp+IIII Meta+IIII Telo n. f. 16; A. serpentina , 2n=12, X1 X1 X2 X2+IVII Meta n. f. 20, , 2n=11 X1 X2, Yg+IVII Meta n. f.22. Se propone que este grupo de especies presenta translocaciones Robertsonianas como mecanismo de especiación, a partir de A. serpentina.

Resumen en inglés

The genus Anastrepha Schiner, endemic to tropical and subtropical América, includes the species Anastrepha ludens, A. obliqua, A. striata and A. serpentina, which are polyphagous and parasite a wide range of plants. These species were studied because of their broad geographic distribution and because they parasite different fruit species. Larvae in their third stage reared in the laboratory of the Programa Moscafrut in Metapa de Domínguez, Chiapas, México, were used. The cerebral ganglia were dissected in an aqueous solution of 1 % (w/v) sodium citrate in which they were kept for 20 min, then transferred to methanol:acetic acid (3:1 (v/v) and macerated in 60 % acetic acid. One drop of this tissue suspension was placed on a slide on a hot plate (45-50 °C) and observed with a microscope (Zeiss Axioskop 40) with phase contrast, and the cells with disperse chromosomes were selected. These were photographed with an AxioCam camera and Axiovision 4.0 software, and measurements were taken with Image Tool 3.0. Twenty cells/sex/species were analyzed. The centromere was observed without pretreatment.

he centromere was observed without pretreatment. Karyotypes were determined in each species: A. ludens , 2n=12, Xg Xg+VII telo, n. f. 12, , 2n=12, Xg Yp+VII Telo n. f. 12; A. obliqua , 2n=12, Xg Xg+VII Telo, n. f. 12, , 2n=12, Xg Yg+VII Telo n. f. 12; A. striata , 2n=12, Xg Xg+IIII Meta+IIIII Telo n. f. 16, , 2n=12, Xg Yp+IIII Meta+IIII Telo n. f. 16; A. serpentina , 2n=12, X1 X1 X2 X2+IVII Meta n. f. 20, , 2n=11 X1 X2, Yg+IVII Meta n. f.22. It is proposed that this group of species has Robertsonian translocations as a speciation mechanism parting from A. serpentina.