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Tesis - Maestría
Caracterización de bacterias promotoras de crecimiento vegetal en las raíces de la orquídea Guarianthe skinneri (Bateman) Dressler y W.E. Higgins / Trinidad Aguilar Díaz
Aguilar Díaz, Trinidad (autor) ; Bertolini, Vincenzo (director) ; Castillo Castañeda, Guillermo Martín (asesor) ; Guillén Navarro, Griselda Karina (asesora) ;
Tapachula, Chiapas, México : El Colegio de la Frontera Sur , 2017
Clasificación: TE/584.15097275 / A3
Bibliotecas: Tapachula
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SIBE Tapachula
ECO020013733 (Disponible)
Disponibles para prestamo: 1
Resumen en español

El objetivo de este estudio fue aislar bacterias presentes en la raíces de la orquídea Guarianthe skinneri (Bateman) Dressler & W.E. Higgins, con el fin de encontrar algunas bacterias promotoras de crecimiento vegetal. Se recolectaron raíces jóvenes con característica fitosanitaria sana, a partir de 10 plantas procedentes del Jardín Botánico Regional del Soconusco, Tuzantán, Chiapas. Se aislaron bacterias del rizoplano y endófitas+rizoplano para caracterizarlas macroscópicamente y microscópicamente, realizando pruebas en condiciones in vitro como: interacción con el hongo micorrízico Thanatephorus sp., (cepa RG26), solubilización de fosfato, producción de ácido indolacético (AIA) y fijación de nitrógeno. El total de colonias bacterianas aisladas fue de 71. En cuanto a los resultados de interacción con el hongo micorrízico RG26 se observó que 6 cepas del rizoplano y 5 cepas endófitas+rizoplano tuvieron una interacción sumamente positivo; 7 cepas del rizoplano y 11 cepas endófitas+rizoplano, positivo; 11 cepas del rizoplano y 14 cepas endófitas+rizoplano antagonismo al 50-50 y 7 cepas del rizoplano y 8 cepas endófitas+rizoplano antagonismo. En relación a la solubilización de fosfato, se obtuvo que 26 cepas del rizoplano y 32 cepas endófitas+rizoplano solubilizaron el fosfato. Respecto a la producción de AIA, la cepa 1-7c del rizoplano alcanzó la mayor producción de AIA, con 69.18 μg/ml y la cepa endófitas+rizoplano 2-10bp presentó 15.95 μg/ml. En los análisis de fijación de nitrógeno se obtuvieron diferencias estadísticas significativas (p-value: 0.05) siendo la cepa del rizoplano 1-10d que presentó mayor concentración de etileno con 10.25 nmol. Mediante la secuenciación del marcador 16s rADN se identificaron 6 cepas: Sphingomonas sp., Sinorhizobium sp., Bacillus sp., Nocardia cerradoensis, Bacillus megaterium y Burkholderia phytofirmans.

La bacteria Bacillus sp., es la mejor cepa para la inoculación de semillas y plántulas de la orquídea G. skinneri, ofreciendo nuevos caminos a reconocer para la consideración de este germoplasma en la región del Soconusco.

Índice

Dedicatoria y Agradecimientos
Tabla de Contenido
Resumen
I. Introducción
Ii. Revisión de Literatura
2.1 La familia Orchidaceae
2.2 Las orquídeas del Soconusco
2.3 Guarianthe skinneri (Bateman) Dressler & W.E. Higgins
2.4 Microorganismos en los exudados radiculares
a) Interacciones de hongos micorrízicos-bacterias benéficas
b) Nutrientes para el desarrollo de las plantas
c) Solubilización de fosfato
d) Hormonas de crecimiento
e) Fijación del nitrógeno
f) Bacterias promotoras de crecimiento vegetal
III. Justificación
IV. Preguntas de Investigación
V. Hipótesis
6.1 Objetivo general
6.2 Objetivos específicos
VI. Objetivos
VII. Metodología
7.1 Diseño general del trabajo de investigación
7.2 Colecta de raíces de Guarianthe skinneri
7.3 Aislamiento y cultivo de los aislados bacterianos
7.4 Análisis macroscópico y microscópico de las colonias
7.5 Conservación de las colonias bacterianas
7.6 Compatibilidad de las bacterias con el Hongo micorrízico RG26
7.7 Determinación de la solubilización de fosfato inorgánico
7.8 Evaluación de la producción del ácido indolacético (AIA)
7.8.1 Curva patrón del ácido indol acético (AIA)
7.8.2 Determinación de ácido indol acético (AIA) de las bacterias
7.9 Evaluación de fijación biológica de nitrógeno (FBN)
7.9.1 Curva patrón del etileno
7.9.2 Determinación de la capacidad de fijación de nitrógeno de las bacterias
7.10 Identificación molecular de las cepas seleccionadas
7.10.1 Extracción de ADN de las bacterias
7.10.2 Amplificación de la región 16s rADN
7.10.3 Purificación de los productos de PCR
7.11 Análisis estadístico

VIII. Resultados
8.1 Caracterización macroscópica y microscópica de bacterias cultivables, aisladas en las raíces de G. skinneri
8.2 Compatibilidad de las cepas bacterianas con el hongo micorrízico Thanatephorus sp., cepa RG26
8.3 Determinación de la solubilización de fosfato inorgánico
8.4 Evaluación de la producción del ácido indolacético (AIA)
8.5 Evaluación de fijación biológica de nitrógeno
8.6 Identificación molecular de las bacterias
8.7 Selección de las cepas bacterianas
IX. Discusión General
9.1 Aislados bacterianos en las raíces de la orquídea G. skinneri
9.2 Compatibilidad de las cepas bacterianas con el hongo micorrízico Thanatephorus sp., cepa RG26
9.3 Solubilización de fosfato inorgánico
9.4 Producción del ácido indolacético (AIA)
9.5 Fijación biológica de nitrógeno (FBN)
9.6 Caracterización de las cepas para considerarse como “Bacterias promotoras de crecimiento vegetal (BPCV)”
X. Conclusiones
XI. Recomendaciones
XII. Literatura Citada
XIII. Anexo
13.1 Resultados de mediciones de las cepas bacterianas en relación a la solubilización de fosfato
13.2 Datos de la curva estándar de AIA para obtener la ecuación de la recta
13.3 Producción de AIA de los aislados del rizoplano y endófitas+rizoplano, de acuerdo a la absorbancia a 530 nm y analizando con la ecuación de la recta
13.4 Resultados para la curva de patrón de etileno y de las cepas bacterianas seleccionadas
13.4.1 Análisis de datos de las 9 cepas bacterianas fijadoras de nitrógeno
13.5 Resultados análisis de secuencias de las 10 cepas bacterianas
13.6 Artículo sometido a la revista


2.
Tesis - Doctorado
Estatus socioeconómico, tecnológico y uso de abonos orgánicos en la producción sustentable de Alpinia purpurata en Tabasco, México / María Isabel Saldaña y Hernández
Saldaña y Hernández, María Isabel ; Gómez Álvarez, Regino (director) ; Pat Fernández, Juan Manuel (asesor) ; Álvarez Solís, José David (asesor) (1959-) ; Ortiz García, Carlos Fredy (asesor) ; Rivera Cruz, María del Carmen (asesora) ;
Villahermosa, Tabasco, México : El Colegio de la Frontera Sur , 2014
Clasificación: TE/635.934390972 / S2
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SIBE Campeche
ECO040005302 (Disponible)
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SIBE Chetumal
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SIBE San Cristóbal
ECO010017503 (Disponible)
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SIBE Tapachula
ECO020013090 (Disponible)
Disponibles para prestamo: 1
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SIBE Villahermosa
ECO050005513 (Disponible)
Disponibles para prestamo: 1
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Índice | Resumen en: Español |
Resumen en español

El uso de fertilizantes químicos en la floricultura ocasiona contaminación del suelo, dependencia tecnológica y altos costos de producción. Una alternativa para la producción sustentable de Alpinia purpurata, son los abonos orgánicos, ya que mejoran las características físicas, químicas y biológicas del suelo. El objetivo de la investigación fue caracterizar el nivel socioeconómico de los floricultores, el manejo tecnológico de la producción de flores de corte, el uso de abonos orgánicos y la presencia de hongos micorrízicos arbusculares (HMA) y bacterias solubilizadoras de fosfatos (BSP) en la producción de A. purpurata en condiciones de trópico húmedo de Tabasco. Se aplicaron encuestas con variables socioeconómicas y técnicas a floricultores con plantaciones >0.25 ha. Los abonos evaluados fueron: Composta, Vermicomposta, Estiércol fermentado, Bocashi y Humus líquido (6 Mg·ha-1 y 60 L·ha-1), Fertilizante Químico (150-50-250) y Testigo absoluto. El diseño experimental fue de bloques completos al azar con tres repeticiones. Se determinó que la floricultura en Tabasco se practica en 111 ha en nueve municipios de las regiones Chontalpa, Centro y Sierra. El 70% de los productores tiene estudios de licenciatura. El 9% ha recibido crédito y 12% asesoría técnica. El 60% recibe ingresos por venta de flor, el 40% no tiene mercado o sus plantaciones son recientes. Los suelos abonados mostraron a los 40 días incrementos de C (40%), N (47%), P (83%) y K (56%), un año después muestran niveles aceptables de fertilidad para la producción. El Estiércol fermentado y Composta aumentaron cinco veces la densidad poblacional de las BSP y 12% la colonización por HMA, favorecieron la producción de biomasa total y calidad de flor.

Índice

Dedicatoria
Agradecimientos
Resumen
Capítulo 1: Introducción
1.1. Justificación
1.2. Preguntas de investigación
1.3. Objetivo general y específicos
1.4. Hipótesis
1.5. Estructura de la tesis
1.6. Antecedentes
1.6.1. Situación social y tecnológica del sector productivo de flores tropicales de corte
1.6.2. Los fertilizantes químicos y sus efectos contaminantes en los ecosistemas
1.6.3. Los abonos orgánicos y su uso como alternativa de fertilización sustentable
1.6.3.1. Los abonos orgánicos en la producción agrícola
1.6.4. Alternativas microbiológicas para mejorar la fertilidad del suelo
1.6.4.1. Las bacterias solubilizadoras de fosfatos y su impacto en la producción agrícola
1.6.4.2. Los hongos micorrízicos arbusculares en el sistema sueloplanta
1.6.5. Características generales de A. purpurata
1.6.5.1. Origen y países productores
1.6.5.2. Características botánicas
1.6.6. Generalidades sobre la nutrición de A. purpurata
Capítulo 2
2.1. Artículo 1: The socioeconomic and technical status of cut flower producers in Tabasco, Mexico
2.2. Artículo 2: Micorrizas arbusculares y bacterias solubilizadoras de fosfatos en la producción orgánica de Alpinia purpurata (Vieill) K. Schum
Capítulo 3. Conclusiones Generales
Literatura Citada
Anexos
1. Artículo sometido para su publicación, Revista Ciencia e Investigación Agraria: “Influencia de abonos orgánicos en las propiedades químicas del suelo, crecimiento y producción de Alpinia purpurata (Vieill) K. Schum”
2. Aspectos éticos de la investigación. Carta emitida por el tutor de la Tesis
3. Acuse de recibido del Segundo artículo aceptado, revista Interciencia
4. Guía de autores para las publicaciones


3.
- Artículo con arbitraje
Rizobacterias promotoras de crecimiento en Guarianthe skinneri (Orchidaceae)
Aguilar Díaz, Trinidad ; Bertolini, Vincenzo (coaut.) ; Carrillo Castañeda, Guillermo (coaut.) ; Guillén Navarro, Griselda Karina (coaut.) ; García Fajardo, Luz Verónica (coaut.) ;
Contenido en: Revista de Biología Tropical Vol. 66, no. 3 (September 2018), p. 953-96 ISSN: 1018-7081
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Resumen en: Español | Inglés |
Resumen en español

La orquídea Guarianthe skinneri está incluida en la norma NOM-059-ECOL-2010 de México como una especie amenazada. Con el fin de estudiar las BPCV (bacterias promotoras del crecimiento vegetal) en esta orquídea, se recolectaron 10 raíces de diferentes plantas para aislar bacterias asociadas a las raíces, que se analizaron mediante pruebas in vitro como: producción de AIA, fijación de nitrógeno, interacción con el hongo micorrízico Thanatephorus sp. cepa RG26 y solubilización de fosfato. De los 71 aislados bacterianos se caracterizaron 10 cepas mediante secuenciación con el marcador 16s rADN y se identificaron seis cepas: Sphingomonas sp., Sinorhizobium sp., Bacillus sp., Nocardia cerradoensis, Bacillus megaterium y Burkholderia phytofirmans. Se observó que la bacteria Sinorhizobium sp. produjo mayor cantidad de AIA (69.189 μg/ml) y Bacillus sp. presentó mayor reducción de acetileno (10.251 nmol cultivo/96 h). En las interacciones de las bacterias y el hongo RG26 se presentaron cuatro categorías (sumamente positivo, positivo, antagonismo 50-50 e inhibición). En relación a la solubilización de fosfato, la bacteria Burkholderia phytofirmans presentó mayor IS a las 48 y 96 h con IS de 3.11 y 3.48, respectivamente. Los resultados indican que Bacillus sp. pudiera tener las mejores características para promover el desarrollo de la orquídea G. skinneri mediante la inoculación de semillas y plántulas.

Resumen en inglés

The Guarianthe skinneri orchid is included in NOM-059-ECOL-2010, Mexico standard as an endangered species. In order to study PGPR (promoting growth plant rhizobacteria) from this orchid, 10 roots were collected from different plants to isolate bacteria associated with the roots, which were analyzed by in vitro tests such as: production of AIA, nitrogen fixation, interaction with the mycorrhizal fungus Thanatephorus sp. strain RG26 and phosphate solubilization. We obtain 71 bacterial isolates, 10 strains of them were characterized by sequencing the 16s rDNA marker identifying six bacteria: Sphingomonas sp., Sinorhizobium sp., Bacillus sp., Nocardia cerradoensis, Bacillus megaterium, and Burkholderia phytofirmans. We observed that the bacterium Sinorhizobium sp. produced a greater amount of AIA (69.189 μg/ml) and Bacillus sp. performed greater acetylene reduction (10.251 nmol/96h). In the interactions of the bacteria and the fungus RG26, four categories were presented (extremely positive, positive, antagonism 50-50 and inhibition). In relation to the solubilization of phosphate, Burkholderia phytofirmans presented higher IS after 48 and 96 h with an IS of 3.11 and 3.48, respectively. The results indicate that Bacillus sp. could have the best characteristics to promote the development of the G. skinneri orchid by inoculating seeds and seedlings.